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酶促反应(Enzymatic Reaction)是指在生物催化剂——酶的介导下,将特定底物高效、专一地转化为产物的生物化学过程。酶通过降低反应活化能,能在温和条件下大幅提高反应速率,而不自身被消耗。它是所有生命活动中代谢与调控的核心基础。摇瓶里装的是从微生物中纯化出来的酶、底物和缓冲液。摇床的作用是提供恒温条件和混合,让酶和底物充分接触,高效进行反应。

在酶促反应中,通常小体积、短时间的标准酶促反应(如PCR、常规酶切),会用到PCR仪或恒温金属浴。然而,对于大体积、长时间或需要持续混匀的反应,恒温摇床则是非常理想的工具,由于其容量大,环境均一性好的特点,可以为酶促反应提供长期稳定的温度和混匀,防止沉淀,效率更高。

一、常用配置:

  • 温度:常用37°C,也有些是4°C, 25°C, 65°C
  • 转速:100-250rpm
  • 振荡方式:首选圆周振荡

二、方案原理:

典型场景:酶促反应

配置参数与原理:

  • 温度设置:常用37°C,也有些是4°C, 25°C, 65°C

大多数来源于哺乳动物或常见微生物的酶的最适温度在 25°C - 40°之间(如37°C)。有些特殊酶(如用于PCRTaq DNA聚合酶)则需要更高的温度(如72°C)。具体温度必须参考产品说明书。

  • 转速设置:100-250rpm

微量反应(如1.5 mL离心管): 200~ 500 rpm

小规模反应(如50 mL锥形瓶): 150~250 rpm

大规模反应(如摇瓶培养): 100~200 rpm

振荡必须确保反应组分(酶、底物、辅因子)均匀分布,避免形成浓度梯度。但是过高的转速会产生剪切力,可能导致酶(尤其是大型酶复合物或膜结合酶)变性失活。同时,高转速会引入大量气泡,导致气-液界面处的酶易于变性,并可能影响光谱检测(如OD值)。

  • 振荡方式:首选圆周振荡

圆周振荡提供柔和、高效的混合,剪切力相对较低,更适合对剪切力敏感的酶促反应。往复式振荡(Reciprocal)更为剧烈,混合更强,但产生剪切力也更大,通常用于细胞破碎、染色等剧烈过程。

 

三、产品推荐:

我们的恒温摇床/振荡器,精度控制有SGS检测报告,在0.5℃以内,是大规模酶促反应理想的实验帮手!

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