‌甲烷氧化菌是一类能够利用甲烷作为碳源和能量的特殊微生物。它们广泛分布于土壤、湿地和海洋等环境中，是自然界中控制甲烷排放的关键生物过滤器。研究该类微生物对于缓解温室效应、开发生物减排技术以及理解全球碳循环过程具有重要科学和应用价值。

一、常用配置：

• 温度：25~30℃

• 转速：120~180rpm

• 培养瓶规格：100~250ml

​​二、方案原理：

典型场景：甲烷氧化菌的富集培养研究

配置参数与原理：

• 温度：25~30℃

甲烷氧化菌是一类对温度条件较为敏感的微生物，其生长适宜温度因菌种差异而有所不同。通常来说，这类微生物最适宜在25℃至30℃的环境中生长。当温度低于20℃或超过35℃时，其生长状态、代谢活性及生理功能均可能受到抑制。多项研究结果表明，在25℃–30℃的培养条件下，甲烷氧化菌能够表现出较高的甲烷氧化效率与较快的生长速率。因此，在温室培养土中，将温度控制在该区间内，有助于优化其培养效果。

• 转速：120~180rpm

甲烷培养：采用250m1三角摇瓶，装100m无机盐培养基，菌体接种量10%(V/V)，使用带有玻璃管的胶塞封口。在上层的空气中置换入甲烷，甲烷和空气体积比为1:1-1:5，28℃、180rpm 空气浴摇床培养。每 24h 换气一次。

提速方法：1.可以加入甲醇，提供充分的碳源，从而提高细胞密度。最佳添加量为0.05%（V/V）。2.可以加入石蜡油，作为一种甲烷传递体，提高甲烷的利用率。最佳添加量为2.5%（V/V）

文献出处：[1]辛嘉英, 董静, 梁洪野, 张帅, 王艳, & 夏春谷. (2010). 甲烷氧化菌的高密度培养.

其他实验要求也有提到：“样本在30℃、120/min的恒温培养箱内恒温振荡浸泡48h后取出，这样的操作。”

• 培养瓶规格：100~250ml

在实验室摇瓶培养中，选择100-250 mL容器（如锥形瓶）并控制装液量（如50 mL/250 mL），是为了优化氧气和甲烷的传输效率。该规格能在摇动时形成最佳气液界面，提供充足气体交换，防止溅出，并兼顾操作便利性与成本，是满足这类高耗氧微生物生长需求的理想规模。